荧光免疫分析仪的技术原理

荧光免疫分析仪的技术原理
荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点，因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物，例如蛋白质（酶、接受体、抗体）、激素（甾族化合物、甲状腺激素、酞激素）、药物及微生物等。
原理
作为免疫分析法的一种，fia同样存在两种模式，即竞争型和夹心型。其中竞争型（以标记抗原的竞争型为例）的测定原理是基于未标记的抗原（ag）和标记抗原（ag-l）竞争结合有限的抗体（ab）而实现的免疫分析法。检测时，ab和ag-l的浓度是固定的。当未标记的ag加到ab和ag-l的免疫混合物中后，ag和ab的结合使得ag-l与ab的免疫复合物的量减少。样品中存在的ag越多，ab结合的ag-l便越少，从ab-ag-l免疫复合物的减少或游离ag-l的增加，可以定量测定出样品中待测抗原的含量。其反应过程如下：ag+ag-l+ab≒（ag：ab）+（ag-l：ab）
对夹心型免疫分析来说，其反应原理是在免疫反应的载体上固定过量的ab，然后加入一定量的ag，免疫反应后，再加入过量的标记抗体（ab-l），以形成“三明治”式夹心免疫复合物。样品中存在的ag越多，结合的ab-l也越多，夹心免疫复合物的标记荧光信号就越强。反应过程如下：ab+ag≒ab：ag≒ab：ag：ab-l。

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