人elisa试剂盒|elisa试剂盒可以用几次
人elisa试剂盒|elisa试剂盒可以用几次
双抗体夹心elisa法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体含量。
液体类标本：
包括血清，血浆，尿液，胸腹水，脑脊液，细胞培养上清液等。
血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中如有沉淀，请再次离心。
血浆：
应根据标本的要求选择edta，柠檬酸钠或者肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，在离心20分钟（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中有沉淀，请再次离心。
尿液：
用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中有沉淀，请再次离心。
细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用pbs（ph7.2-7.4）稀释细胞悬液，当细胞浓度达到100万/ml左右，通过反复冻融，使细胞破坏并释放细胞内的成份，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中有沉淀，请再次离心。
组织标本：
切割标本后，称取重量，加入一定量的pbs（ph7.4），用液氮迅速冷冻保存备用，标本融化后仍保持2-8℃的温度，加入一定量的pbs（ph7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，分装后留一份待检测，其余冷冻备用。
人elisa试剂盒|elisa试剂盒可以用几次相关实验研究：
α烯醇化酶基因调节胃癌增殖及其机制研究
摘要：α-烯醇化酶基因(eno1)是糖酵解过程中的一种代谢酶,催化2-磷酸甘油酸转化磷酸烯醇式丙酮酸。eno1在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用,但是尚未有研究报道eno1在胃癌中的作用,因此其在胃癌中的具体功能和发挥作用的分子机制有待深入研究。目的检测eno1基因在人胃癌组织及癌旁组织中的表达量,研究eno1基因在胃癌发生发展中的重要生物学功能,并深入探讨其参与胃癌发生发展的机制。方法1.首先通过免疫组织化学染色检测eno1在胃癌肿瘤组织及癌旁组织中的表达情况,并与tcga数据库中的结果进行比较;应用kaplan-meier法分析eno1基因表达量与胃癌患者预后的相关性。2.应用rna干扰技术靶向沉默胃癌细胞株eno1基因的表达,通过cck8实验、克隆形成实验、凋亡实验、细胞周期实验及划痕实验检测eno1对胃癌细胞株生物学功能的影响。3.应用affymetrix人类全基因表达谱芯片检测eno1基因干扰前后胃癌细胞株mgc-803中全基因组mrna表达丰度。
试剂盒的组成：
（1）结合物及标本的稀释液；
（2）洗涤液，在板式elisa中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；
（3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；
（4）酶的底物；
（5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），elisa试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；
（6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）
用途：科研与实验专用试剂，不得用于临床诊断。
检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠elisa检测试剂盒等种属。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
人elisa试剂盒解决办法：
血清是zui常用的人elisa试剂盒标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种,本文主要为大家介绍内源性物质：
内源性物质： 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。
（1）类风湿因子
人血清中igm、igg型类风湿因子（rf）可以与人elisa试剂盒系统中的捕获抗体及酶标记二抗的fc段直接结合，从而导致假阳性。
解决该情况的办法是：
①用f(ab)2替代完整的igg；
②标本用联有热变性（63℃，10 min）igg的固相吸附剂处理（将热变性igg加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中，使rf降解。
（2）补体 elisa系统中固相一抗和标记二抗过程中，人elisa试剂盒抗体分子发生变构，其fc段的补体c1q分子结合位点被暴露出来，使c1q 可以将二者连接起来，人elisa试剂盒从而造成假阳性。解决的办法是：①用edta稀释标本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加热血清使c1q灭活。
（3）嗜异性抗体 人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）ig (s) 结合的天然嗜异性抗体，可将elisa系统中一抗和二抗连接起来，也能造成假阳性。解决的办法是：可在标本稀释液中加入过量的动物ig (s) ，但加入量不足或亚类不同时无效。
（4）嗜靶抗原的自身抗体 抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶抗原结合形成复合物，在人elisa试剂盒方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现，测定前需用理化方法将其解离后再测定。
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血清：
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血浆：
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尿液：
用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中有沉淀，请再次离心。
细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用pbs（ph7.2-7.4）稀释细胞悬液，当细胞浓度达到100万/ml左右，通过反复冻融，使细胞破坏并释放细胞内的成份，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如保存过程中有沉淀，请再次离心。
组织标本：
切割标本后，称取重量，加入一定量的pbs（ph7.4），用液氮迅速冷冻保存备用，标本融化后仍保持2-8℃的温度，加入一定量的pbs（ph7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，分装后留一份待检测，其余冷冻备用。
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