分离提取多酚氧化酶（PPO）
多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，ppo催化酚与o2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。
ppo的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。ppo氧化内源的酚类物质生成邻醌，邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成，色素分子量愈高，颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。
本实验将采用马铃薯为主要材料，通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得ppo的粗酶液。
通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关仪器设备的操作使用，以及蛋白质的提取、分离的系统技术。
材料与试剂
（1）马铃薯（大约每小组100-200g）
（2）试剂：
0.03m磷酸缓冲液ph6.0(内含0.02m巯基乙醇，0.001medta，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03m磷酸缓冲液ph6.0（内含0.02m巯基乙醇，0.001medta，0.005mgcl2）配置时配
（3）实验器械与仪器设备：
试管与试管架；烧杯、玻璃搅棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；
过滤纱布；植物组织匀浆器；ph计和ph试纸；gl-20c高速冷冻离心机；
dl-7a大容量低速冷冻离心机
操作步骤
1：粗酶提取：
水果肉组织按1：1（w/v）比例与003m磷酸缓冲液ph6.0（内含0.02m巯基乙醇，0.001medta，5%甘油，1%聚乙烯吡咯烷酮）混合，匀浆4层后纱布过滤，滤液以6000rpm离心10min，弃除沉淀获得酶提取液。
2：盐析分级沉淀：
在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40%饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），然后6000rpm离心20min弃除沉淀；离心上清液在加入固体硫酸铵达到70%饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），再以6000rpm离心20min，弃除上清夜，收集粗酶沉淀。
实验结果
获得ppo粗酶液。
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2：盐析分级沉淀：
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